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【摘要】：本论文从七个方面对越南凉粉草组织培养及快繁技术体系进行探讨,分别为：(1)外植体灭菌试验；(2)愈伤组织诱导试验；(3)愈伤组织分化成苗试验；(4)无菌组培苗芽增殖试验；(5)无菌组培苗芽玻璃化作用因子试验；(6)无菌组培苗生根壮苗试验：(7)无菌组培苗移栽试验。主要探讨结果如下：
1.在越南凉粉草外植体灭菌试验中,以0.1%HgCl2灭菌处理11min后再以75%酒精处理55s,对嫩茎段外植体灭菌效果最佳,平均污染率仅为3.17%。
2.在越南凉粉草愈伤组织诱导试验中,以培养基MS/蔗糖25g/L/琼脂6g/L/NAA0.1mg/L/2,4-D1.Omg/L对嫩叶片的愈伤组织诱导效果最佳,出愈率达100%,愈伤组织大小为0.72cm3。
3.在越南凉粉草愈伤组织分化试验中,嫩茎段经愈伤组织诱导培养基MS/蔗糖25g/L/琼脂6g/L/NAA0.1mg/L/6-BA1.0mg/L诱导出的嫩茎段愈伤组织,在分化培养基MS/蔗糖25g/L/琼脂6g/L/6-BA1.0mg/L/NAA0.3mg/L/KT0.5mg/L中的芽苗分化效果最理想,芽分化率为79.17%。
4.在越南凉粉草组培苗芽增殖试验中,以第七代茎顶部单芽接种于含20g/L蔗糖的MS基本培养基中的芽增殖效果较佳；细胞分裂素以CPPU对芽增殖效果好,且CPPU0.7mg/L对芽增殖的前、后效应影响均显著；生长素则以IAA0.05mg/L对芽增殖的效果较为理想,芽增殖倍数达8.41倍。
5.在越南凉粉草组培苗芽玻璃化作用因子试验中,以MS/蔗糖35g/L/琼脂6g/L/6-BA0.1mg/L/NAA0.05mg/L/AC0.9g/L处理,对降低芽玻璃化的效果最佳,芽玻璃化率仅为13.56%,但芽苗的长势却不好。
6.在越南凉粉草组培苗生根壮苗试验中,接种部位以茎顶部为最适生根部位；生长素以IAAO.3mg/L处理的效果为好,生根率为99.33%,平均生根数达最多,为10.02条/株,平均根长为1.03cm;多效唑(PP333)浓度则以PP3330.6mg/L处理效果为优,平均生根率为100%,平均生根数达最多,为23.56条/株,平均根长为0.33cm;B9以B90.4mg/L处理的效果最好,平均生根率为100%,平均生根数达最多,为27.63条／株,平均根长为1.24cm。
7.在越南凉粉草组培苗移栽试验中,以珍珠岩：泥炭(1：2)为移栽基质处理的移栽效果最佳,移栽成活率为78.33%。
【关键词】：越南凉粉草 愈伤组织诱导与分化 芽增殖 玻璃化 生根壮苗 移栽
摘要4-6 Abstract6-13 1 前言13-19 1.1 概述13-16 1.1.1 凉粉草的分布及生长习性13 1.1.2 凉粉草的生物学特性13-14 1.1.3 凉粉草的化学成分及其药理影响探讨14-16 1.1.4 凉粉草的分子生物学探讨16 1.1.5 凉粉草的食用及药用探讨16 1.2 国内外凉粉草繁殖技术探讨进展16-18 1.2.1 凉粉草组织培养及快繁技术探讨进展16-17 1.2.2 凉粉草栽培技术探讨进展17-18 1.3 展望18-19 2 本探讨的目的意义、探讨内容以及技术路线19-21 2.1 探讨目的意义19 2.2 探讨内容19-20 2.3 技术路线20-21 3 材料与措施21-41 3.1 试验材料21 3.1.1 外植体诱导试验材料21 3.1.2 继代增殖及生根壮苗试验材料21 3.1.3 移栽试验材料21 3.2 试验仪器设备与试验药品21 3.2.1 试验仪器设备21 3.2.2 试验药品21 3.3 试验措施21-23 3.3.1 培养基的制备21-22 3.3.2 培养条件22 3.3.3 观测指标与统计措施22-23 3.4 越南凉粉草外植体灭菌作用因子的试验设计23-25 3.4.1 0.1%HgCl_2不同灭菌时间对越南凉粉草外植体灭菌的试验设计23 3.4.2 10%NaClO不同灭菌时间对越南凉粉草外植体灭菌的试验设计23-24 3.4.3 灭菌剂组合不同灭菌时间对越南凉粉草外植体灭菌的试验设计24-25 3.5 越南凉粉草无菌组培苗愈伤组织诱导及分化成苗作用因子的试验设计25-27 3.5.1 不同激素处理对越南凉粉草不同部位愈伤组织诱导的试验设计25-26 3.5.2 不同激素处理对越南凉粉草不同部位愈伤组织分化成苗的试验设计26-27 3.6 越南凉粉草无菌组培苗芽增殖作用因子的试验设计27-35 3.6.1 不同基本培养基(MS、Miller和改良White)对越南凉粉草芽增殖作用的试验设计27-28 3.6.2 不同接种部位(茎顶部、茎中部及茎基部)对越南凉粉草芽增殖作用的试验设计28-29 3.6.3 不同浓度蔗糖及单/丛芽接种对越南凉粉草芽增殖作用的试验设计29-30 3.6.4 不同种类细胞分裂素与IAA组合对越南凉粉草芽增殖作用的试验设计30 3.6.5 不同种类生长素与KT组合对越南凉粉草芽增殖作用的试验设计30-31 3.6.6 不同培养代数对越南凉粉草芽增殖作用的试验设计31-32 3.6.7 IAA/6-BA与TDZ不同浓度组合对越南凉粉草芽增殖作用的试验设计32-33 3.6.8 IAA/6-BA与CPPU不同浓度组合对越南凉粉草芽增殖作用的试验设计33-34 3.6.9 IAA/6-BA与KT不同浓度组合对越南凉粉草芽增殖作用的试验设计34 3.6.10 CPPU后效应对越南凉粉草芽增殖作用的试验设计34-35 3.7 越南凉粉草无菌组培苗芽玻璃化作用因子的试验设计35-37 3.7.1 不同浓度蔗糖对越南凉粉草芽玻璃化作用的试验设计35-36 3.7.2 不同浓度活性炭(AC)对越南凉粉草芽玻璃化作用的试验设计36-37 3.7.3 不同浓度B9对越南凉粉草芽玻璃化作用的试验设计37 3.8 越南凉粉草无菌组培苗生根壮苗作用因子的试验设计37-40 3.8.1 不同接种部位对越南凉粉草生根壮苗作用的试验设计37-38 3.8.2 不同种类生长素对越南凉粉草生根壮苗作用的试验设计38 3.8.3 不同浓度多效唑(PP_(333))对越南凉粉草生根壮苗作用的试验设计38-39 3.8.4 不同浓度B_9对越南凉粉草生根壮苗作用的试验设计39-40 3.9 移栽基质对越南凉粉草组培生根苗移栽成活作用的试验设计40-41 4 结果与略论41-67 4.1 越南凉粉草外植体灭菌作用因子的试验结果41-44 4.1.1 0.1%HgCl_2不同灭菌时间对越南凉粉草外植体灭菌效果的作用41-42 4.1.2 10%NaClO不同灭菌时间对越南凉粉草外植体灭菌效果的作用42-43 4.1.3 灭菌剂组合不同灭菌时间对越南凉粉草外植体灭菌效果的作用43-44 4.2 越南凉粉草无菌组培苗愈伤组织诱导及分化成苗作用因子的试验结果44-47 4.2.1 不同激素处理对越南凉粉草不同部位愈伤组织诱导的作用44-45 4.2.2 不同激素处理对越南凉粉草不同部位愈伤组织分化成苗的作用45-47 4.3 越南凉粉草无菌组培苗芽增殖作用因子的试验结果47-58 4.3.1 不同种类基本培养基(MS、Miller和改良White)对越南凉粉草芽增殖的作用47-48 4.3.2 不同接种部位(茎顶部、茎中部和茎基部)对越南凉粉草芽增殖的作用48-49 4.3.3 不同蔗糖浓度及单/丛芽接种对越南凉粉草芽增殖的作用49-50 4.3.4 不同种类细胞分裂素与IAA组合对越南凉粉草芽增殖的作用50-52 4.3.5 不同种类生长素与KT组合对越南凉粉草芽增殖的作用52-53 4.3.6 不同培养代数对越南凉粉草芽增殖的作用53-54 4.3.7 IAA/6-BA与TDZ不同浓度组合对越南凉粉草芽增殖的作用54-55 4.3.8 IAA/6-BA与CPPU不同浓度组合对越南凉粉草芽增殖的作用55-56 4.3.9 IAA/6-BA与KT不同浓度组合对越南凉粉草芽增殖的作用56-57 4.3.10 CPPU后效应对越南凉粉草芽增殖的作用57-58 4.4 越南凉粉草无菌组培苗芽玻璃化作用因子的试验结果58-61 4.4.1 不同浓度蔗糖对越南凉粉草芽玻璃化的作用58-59 4.4.2 不同浓度活性炭(AC)对越南凉粉草芽玻璃化的作用59-60 4.4.3 不同浓度B9对越南凉粉草芽玻璃化的作用60-61 4.5 越南凉粉草无菌组培苗生根壮苗作用因子的试验结果61-65 4.5.1 不同接种部位对越南凉粉草生根壮苗的作用61-62 4.5.2 不同种类生长素对越南凉粉草生根壮苗的作用62-63 4.5.3 不同浓度多效唑(PP_(333))对越南凉粉草生根壮苗的作用63-64 4.5.4 不同浓度B_9对越南凉粉草生根壮苗的作用64-65 4.6 不同移栽基质对越南凉粉草组培苗移栽成活的作用65-67 5 略论与讨论67-74 5.1 越南凉粉草外植体灭菌效果的作用因子67 5.2 越南凉粉草组培苗愈伤组织诱导及分化成苗的作用因子67-68 5.3 越南凉粉草无菌组培苗芽增殖的作用因子68-70 5.3.1 基本培养基对芽增殖的作用68 5.3.2 蔗糖浓度及单/丛芽接种对芽增殖的作用68-69 5.3.3 激素种类、浓度及配比与越南凉粉草芽增殖生长的相关性69 5.3.4 培养代数与越南凉粉草芽增殖生长的相关性69-70 5.3.5 两种细胞分裂素与IAA组合与越南凉粉草芽增殖生长的相关性70 5.3.6 CPPU后效应与越南凉粉草芽增殖生长的相关性70 5.4 越南凉粉草无菌组培苗芽玻璃化的作用因子70-71 5.5 越南凉粉草无菌组培苗生根壮苗的作用因子71-72 5.5.1 接种部位与越南凉粉草生根壮苗的相关性71-72 5.5.2 生长素种类与越南凉粉草生根壮苗的相关性72 5.5.3 多效唑(PP_(333))浓度及B_9浓度与越南凉粉草生根壮苗的相关性72 5.6 不同移栽基质是越南凉粉草组培苗移栽成活的重要作用因子72-73 5.7 后续工作计划73-74 6 主要结论74-76 致谢76-77 参考文献77-83 附录A83-85 附录B85-88 附录C (版图说明)88-93 ，越语论文网站，越语论文网站 |
